Sao chép và phân loại DNA
Đã giới thiệu| English | Ý nghĩa |
|---|---|
| amplify/ˈæmplɪfaɪ/ | khuếch đại |
| gel electrophoresis/dʒel ɪˌlektrəʊfɔːˈriːsɪs/ | Điện di gel |
| microarray/ˈmaɪkrəʊəreɪ/ | Vi mảng |
| genome/ˈdʒiːnəʊm/ | Genome |
| polymerase chain reaction/ˌpɒlɪməˈreɪz tʃeɪn rɪˈækʃn/ | phản ứng chuỗi polymerase |
| Taq polymerase/tæk ˌpɒlɪməˈreɪz/ | enzym polymerase Taq |
Khuếch đại bằng chứng
- Để nghiên cứu DNA, chúng ta thường cần hàng triệu bản sao.
- PCR tạo ra chúng; điện di gel phân loại các mảnh theo độ dài.
- Microarrays và cơ sở dữ liệu xử lý toàn bộ bộ gen.
PCR
- Phản ứng chuỗi polymerase (PCR) nhân bản và khuếch đại DNA — hàng triệu bản sao.
- Nó lặp lại các chu kỳ đốt nóng và làm mát, sử dụng enzyme bền nhiệt Taq polymerase Taq.
- Mỗi chu kỳ bốn gấp DNA (lưu ý: trong ngữ cảnh sinh học chuẩn, đây thường là 'hai gấp', nhưng nếu yêu cầu giữ nguyên cấu trúc câu gốc thì dịch sát nghĩa; tuy nhiên, theo kiến thức chuẩn PCR, mỗi chu kỳ nhân bản DNA nên dùng '_psát sinh hai bản sao' hoặc 'tăng gấp đôi'. Tuy nhiên, đề bài yêu cầu dịch giá trị JSON từ tiếng Anh sang tiếng Việt. Câu gốc là "doubles" -> "_psát sinh hai bản sao" hoặc "tăng gấp đôi". Để chính xác về mặt thuật ngữ khoa học, ta sẽ dùng "_psát sinh hai bản sao" hoặc "tăng gấp đôi". Nhưng vì đây là dịch thuật, "doubles" = "_psát sinh hai bản sao" hay "tăng gấp đôi". Tôi sẽ chọn "_tăng gấp đôi" để tự nhiên hơn).
Máy khuếch đại nhiệt tự động hóa các chu kỳ nhiệt/lạnh của quá trình PCR.
Phản ứng chuỗi polymerase (PCR)
Thực hiện từng chu kỳ. Nhiệt độ tách DNA, mồi liên kết, polymerase sao chép — và lượng DNA tăng gấp đôi sau mỗi chu kỳ.
Phản ứng chuỗi polymerase (PCR) được dùng để:
Difficulty 1/5 · 100 coins + a small bonus on first completion today
PCR mở rộng DNA thông qua các chu kỳ nóng/lạnh lặp lại sử dụng polymerase Taq.
Kỹ thuật tạo hàng triệu bản sao của một mẫu DNA là phản ứng ______.
Difficulty 1/5 · 100 coins + a small bonus on first completion today
PCR (phản ứng chuỗi polymerase) sử dụng polymerase Taq để sao chép DNA qua nhiều chu kỳ.
Trong mỗi chu kỳ PCR, lượng DNA:
Difficulty 1/5 · 100 coins + a small bonus on first completion today
Mỗi chu kỳ sao chép mọi strand, vì vậy DNA khoảng gấp đôi — tạo ra tăng trưởng mũ.
Sắp xếp một chu kỳ PCR theo thứ tự.
Difficulty 3/5 · 200 coins + a small bonus on first completion today
Denature → lai ghép → kéo dài, sau đó lặp lại. Sự nhân đôi khiến quá trình này mang tính lũy thừa.
Điện di gel
- Điện di gel phân tách các mảnh DNA dựa trên chiều dài.
- Các mảnh di chuyển qua gel trong điện trường, hướng về phía cực +.
- Các mảnh ngắn hơn di chuyển xuống dưới xa hơn, do đó các kích thước phân bố thành các dải riêng biệt.
Điện trường kéo các mảnh DNA qua gel; những mảnh ngắn hơn di chuyển xuống dưới xa hơn, sắp xếp chúng theo chiều dài
Các mảnh DNA được phân tách thành các dải phát sáng nhờ điện di gel, quan sát dưới ánh sáng UV
Trong điện di trên gel, các đoạn DNA ngắn hơn:
Difficulty 1/5 · 100 coins + a small bonus on first completion today
Các đoạn di chuyển về phía cực +; những đoạn ngắn hơn đi xa hơn, giúp phân tách DNA theo độ dài.
Trong điện di trên gel, các đoạn DNA ngắn hơn di chuyển xa hơn trong gel so với các đoạn dài hơn.
Difficulty 1/5 · 100 coins + a small bonus on first completion today
DNA mang điện tích âm nên di chuyển về cực dương; các đoạn nhỏ luồn xuyên qua gel dễ dàng hơn, do đó đi được xa hơn.
Microarray và cơ sở dữ liệu
- Microarray nghiên cứu toàn bộ genome và xác định gen nào đang được bật (bằng cách bắt mRNA của chúng).
- Cơ sở dữ liệu lưu trữ trình tự DNA và protein, giúp các nhà khoa học ở bất cứ đâu so sánh chúng.
Mảng vi thể (microarrays) được sử dụng để:
Difficulty 1/5 · 100 coins + a small bonus on first completion today
Mảng vi thể phát hiện hoạt động gen trên toàn bộ hệ gen bằng cách thu nhận mRNA của các gen đã biểu hiện.
Bạn đã nắm vững
- PCR khuếch đại DNA (chu kỳ nhiệt/lạnh, enzym Taq polymerase); mỗi chu kỳ tạo ra hai bản sao
- điện di gel sắp xếp các mảnh theo chiều dài — mảnh ngắn hơn đi xuống dưới xa hơn về phía cực +
- microarray cho biết gen nào đang bật; cơ sở dữ liệu lưu trữ trình tự để so sánh