Факторы, влияющие на действие ферментов

Что изменяет скорость фермента

• Изменение условий меняет скорость работы фермента.
• Сначала нам нужно справедливо измерить эту скорость.
• Затем мы посмотрим, как температура, pH и концентрация влияют на неё.

Измерение скорости

• Отслеживайте, как быстро образуется продукт (например, собирайте кислород от действия каталазы) или как быстро исчезает субстрат (например, обесцвечивание йода при переваривании крахмала амилазой).
• Колориметр превращает изменение цвета в точное числовое значение, которое можно построить на графике.
• Реакция протекает быстрее всего в начальный момент (наибольшее количество субстрата), поэтому начальная скорость — наклон касательной в момент времени ноль — является наиболее справедливым показателем для сравнения.

Начальная скорость — наклон в самом начале — является наиболее справедливым показателем для сравнения.

Температура

• Нагрев увеличивает кинетическую энергию молекул, поэтому они сталкиваются чаще — скорость возрастает.
• Но за пределами оптимума тепло разрывает связи, удерживающие форму фермента: он денатурирует, активный центр больше не подходит, и скорость резко падает.

pH

• У каждого фермента есть оптимальный pH. Если отклониться слишком сильно в любую сторону, он денатурирует, поэтому скорость снижается.
• Чтобы исследовать pH справедливо, поддерживайте его стабильным с помощью буферного раствора.

Концентрация фермента и субстрата

• Больше фермента (при избытке субстрата) означает больше активных центров, поэтому скорость растет пропорционально.
• Больше субстрата сначала ускоряет процесс — но как только каждый активный центр занят, добавление еще больше не имеет значения, и скорость выходит на плато.
• Больше ингибитора снижает скорость.
• Исследуйте ниже: перетащите ползунок субстрата и наблюдайте, как растет скорость, а затем выравнивается, когда все активные центры заполнены.

Вы поняли